Échantillonnage d'E.coli avec R-Cards™
Conseils sur l'utilisation des R-Cards™ pour l'échantillonnage d'E.coli
Water Rangers a développé un kit d'échantillonnage complet et un protocole pour guider les testeurs bénévoles dans l'obtention de résultats toujours fiables.
En guise d'alternative, nous avons adopté la méthode de test rapide ROTH R-Card™. Cette approche permet aux volontaires de traiter les échantillons à domicile dans un petit incubateur économique et de communiquer leurs résultats. Les R-Cards fournissent une indication fiable de E. coli Les niveaux dans les échantillons. Leur prix abordable permet de réaliser plusieurs tests, aidant ainsi à identifier les « points d'intérêt » potentiels avant d'employer des méthodes de test plus précises.
Se préparer à tester
Avant de commencer les tests, assurez-vous d’avoir préparé votre kit, identifié votre lieu de test et établi le calendrier des tests et de l’incubation.
Le kit
Water Rangers a mis au point un kit d'échantillonnage et un protocole pour aider les testeurs bénévoles à obtenir des résultats toujours fiables.
Le Kit se compose de :
- Un plateau d'échantillonnage pour permettre aux cartes d'être disposées et maintenues à niveau - important pendant que l'échantillon est appliqué sur les cartes R.
- Un cahier pour enregistrer les observations qualitatives dans le cadre de l'activité d'échantillonnage.
- Un appareil de mesure combiné de conductivité et de température de l'eau.
- Une tasse d'échantillonnage.
- Un bâton de « reach » pour aider à collecter l'échantillon.
- Gants de protection.
- Sacs d’échantillonnage contenant trois cartes R et une seringue de 1 ml – un sac par emplacement et par événement de test.
- Une petite serviette.
- Un incubateur « personnel » à utiliser à la maison.
- Un conductimètre
Les sacs d'échantillonnage seront fournis pour un test d'un mois - normalement 5 sacs par mois.
À propos de R-Cards™
La R-CARD™ se compose d'une partie inférieure (3 cm x 4 cm) imprimée et de carrés de XNUMX cm (½ po), d'une partie supérieure en film transparent contenant une formule en poudre sur sa face inférieure et d'une impression textuelle indiquant le type de formule (par exemple, E. coli). La partie supérieure est pré-fixée à la partie inférieure.
Basé sur une technologie impliquant des composants secs attachés à une carte, il y a quelques éléments généraux à garder à l'esprit, qui sont communs à la plupart des produits de cette nature.
- Ils doivent être conservés au sec et à l'abri de l'humidité. S'ils sont mouillés, ils
devenir inutilisable. - Il est préférable que les cartes ne soient pas soumises à une lumière ou à une chaleur de forte intensité.
En gardant ces éléments à l'esprit, il est préférable de conserver les R-CARDS dans les sacs scellés dans lesquels elles ont été livrées. Cela ne signifie pas qu'elles ne peuvent pas être exposées à des conditions normales pendant des jours ou des semaines où les températures ne dépassent pas 40 degrés Celsius ou où l'humidité est normalement inférieure à 100 %.
Pour de meilleures performances, les cartes doivent être conservées congelées jusqu'à ce qu'elles soient nécessaires à l'échantillonnage.
Échantillonnage d'E. coli avec R-Cards™
Préparez votre trousse
- Mettez des gants
- Étiquetez chaque carte avec la date, le lieu et le numéro de chaque carte (1 à 3).
- Remplissez votre enquête sur les paramètres environnementaux et autres
- Disposez les cartes R dans le plateau : assurez-vous qu'elles sont de niveau
Échantillonnage de produits
- Rincer le récipient à échantillon 3 fois
- Prélevez l’échantillon à 15 cm sous la surface, ou aussi profondément que possible sans inclure de sédiments.
- Remplissez la seringue jusqu'au repère 1 ml (tapez pour éliminer les bulles d'air !).
- Soulevez doucement le film et vaporisez de l’eau sur la carte.
- Déroulez le film sur l'échantillon, en laissant l'eau se répandre en un motif circulaire entre le film et la carte. L'eau doit se trouver dans la zone du film supérieur, mais n'a pas besoin de couvrir toute la zone. N'APPUYEZ PAS sur le film... laissez-le s'étaler.
- Répétez l’opération pour chacune des trois cartes d’un emplacement en utilisant le même échantillon.
- Laissez les cartes R se sceller (1 à 2 minutes), puis placez-les dans le sac et scellez-les.
En cours
- Conservez les cartes à l'abri de la lumière directe du soleil et au frais. Utilisez une compresse froide par temps chaud, mais NE placez PAS les cartes sur de la glace.
- Allumez l'incubateur et laissez-le chauffer pendant 20 minutes jusqu'à atteindre 35 °C.
- Les cartes doivent être placées dans l'incubateur dans les 3 heures suivant la collecte.
- Incuber les cartes pendant 24 heures avant de compter les colonies.
- Faites la moyenne des résultats des trois cartes, puis multipliez par 100 pour obtenir le nombre d'unités formant colonie (UFC) pour 100 ml.
Incubez vos R-Cards
Le kit de test R-Card comprend un « incubateur domestique », un petit appareil alimenté par USB-C, conçu à l'origine pour l'incubation domestique de petits œufs. Il permet une température d'incubation contrôlée et constante.
Réglez la température de l'incubateur à 35 °C (la valeur par défaut est de 37.8 °C) et laissez-le se réchauffer à cette température avant d'insérer les cartes R.
Résultats du comptage 24 heures après avoir placé les cartes dans l'incubateur.
Ne comptez pas les colonies qui pourraient se développer après 48 heures, car les E. coli et les coliformes que vous surveillez se développent très rapidement et seront certainement visibles pendant cette période.
Les cartes doivent être placées face imprimée vers le haut et peuvent être empilées les unes sur les autres.
Prendre soin de votre incubateur
L'incubateur est livré avec quelques éléments supplémentaires tels que des rouleaux et des bouteilles d'eau pour hydrater les œufs - ceux-ci ne sont pas nécessaires pour l'incubation des R-Cards et peuvent être conservés de côté.
L'incubateur est recouvert de polystyrène qui aide à retenir la chaleur et à minimiser les coûts énergétiques, alors gardez-le en place.
L'incubateur doit être nettoyé avant chaque utilisation avec une solution d'eau de Javel douce ou antibactérienne.
Interprétation de vos résultats : Comment pouvons-nous mesurer les risques sanitaires à la plage en utilisant E.coli ?
La concentration d'E.coli dans un échantillon d'eau est généralement mesurée pour 100 ml. Les méthodes pour mesurer E.coli comprennent la filtration sur membrane (CFU), la fermentation multitubes (MPN) et des méthodes de traitement plus rapides telles que les méthodes qPCR.
Au Canada, les lignes directrices du gouvernement fédéral, Recommandations pour la qualité des eaux récréatives au Canada, pour E.coli sont les suivants :
Directives E.coli pour les loisirs avec contact primaire∗
- Concentration moyenne géométrique (minimum 5 échantillons) ≤ 200 E. coli /100 mL
- Concentration maximale d'un seul échantillon ≤ 400 E. coli /100 mL
Les pays, les États et les provinces ont leurs propres normes et protocoles, mais la plupart sont très similaires lorsqu'il s'agit de quantifier E. coli à la plage.
Les seuils pour E. coli dans les eaux de baignade anglaises :
- Excellent:Le seuil d'E. coli est ≤ 500 unités formant des colonies pour 100 ml (UFC/100 ml)
- Bon:Le seuil d'E. coli est ≤1000 UFC/100 mL
- Suffisant:Le seuil d'E. coli est ≤900 UFC/100 mL
- Médiocre:Les valeurs d'E. coli sont pires que le seuil suffisant
En Écosse, les valeurs sont :
- Excellent:Le seuil d'E. coli est ≤250 UFC/100 mL
- Bon:Le seuil d'E. coli est ≤500 UFC/100 mL
Enregistrement des résultats
Les résultats moyens peuvent être enregistrés à l'aide de l'application Water Rangers ou de la page Web. Annotez le relevé d'observation à l'aide d'une carte R. Ces résultats sont disponibles à l'adresse waterrangers.com/community-lab-results.
Pour les groupes de test de River Wey, vous pouvez saisir vos résultats à https://forms.gle/H8u1WaEMM5i6v1qz8 et ces résultats sont présentés à riverweytrust.org.uk/waterquality.
Vidéo explicative de Kentucky Watershed Watch
Des commentaires ? Nous sommes à votre écoute.
Nous aimerions connaître votre expérience et vos commentaires sur le kit de test E. coli. Vos réponses nous aideront à améliorer le kit et notre processus de formation. Toutes les réponses sont confidentielles et seront utilisées uniquement pour améliorer le programme.
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